El control de impurezas en la fabricación farmacéutica ha experimentado una transformación profunda con la aparición de las N‑nitrosaminas como impurezas mutagénicas de alta potencia. Desde el descubrimiento inicial de NDMA en productos basados en sartanes en 2018, los organismos reguladores han ido refinando de manera continua sus expectativas para proteger la salud pública.
Las recientes actualizaciones introducidas por la Agencia Europea de Medicamentos (EMA), en particular las revisiones relacionadas con los límites de ingesta aceptable y las medidas regulatorias de implementación más amplias, constituyen un avance relevante en la definición de límites de exposición seguros y en la armonización de los criterios de evaluación de riesgo a lo largo del ciclo de vida farmacéutico. Estas directrices sobre nitrosaminas subrayan la necesidad de una gestión proactiva de impurezas, respaldada por una ciencia analítica sólida y rigurosa.
Actualización del Apéndice 1 de la EMA: nuevos límites de ingesta aceptables para nitrosaminas
Uno de los desarrollos más relevantes dentro de la actualización de las directrices de la EMA sobre nitrosaminas es el refinamiento de los límites de ingesta aceptable (IA) publicados a través del marco del Apéndice 1. Estos límites definen los umbrales máximos de exposición diaria destinados a mantener el riesgo vitalicio de cáncer por debajo de 1 en 100.000 pacientes, en consonancia con los principios internacionales de impurezas basadas en riesgo establecidos en la directriz ICH M7.
Esta revisión introduce nuevos límites de ingesta aceptable asociados a impurezas relacionadas con la sustancia activa derivadas de nitrosaminas (NDSRIs) recientemente identificadas, vinculadas a los procesos de fabricación de varios principios activos, entre ellos levodropropizina, citisina, lumefantrina, mifepristona, tapentadol y selumetinib.
Paralelamente, los reguladores han definido un límite de ingesta aceptable para una impureza nitrosamínica formada a partir del ingrediente de fragancia metil N-metilantranilato, reflejando la creciente atención regulatoria hacia fuentes de impurezas menos tradicionales, más allá de la síntesis central del API.
El establecimiento de estos nuevos valores de ingesta aceptable indica que las evaluaciones de riesgo deben mantenerse dinámicas y basadas en datos a lo largo de todo el ciclo de vida del producto.
Comparativa regulatoria: enfoques de EMA y FDA en el control de nitrosaminas
La Agencia Europea de Medicamentos (EMA) y la Food and Drug Administration (FDA) coinciden en gran medida en el control de impurezas nitrosamínicas en productos farmacéuticos, basándose en principios científicos compartidos derivados de las directrices ICH sobre impurezas nitrosamínicas, en particular ICH M7(R2). Sus expectativas regulatorias convergen principalmente en tres acciones clave:
- Realizar evaluaciones de riesgo que analicen las posibles vías de formación de nitrosaminas.
- Ejecutar pruebas confirmatorias mediante métodos analíticos sensibles y validados.
- Implementar cambios en los procesos de fabricación o en la formulación para mantener las impurezas por debajo de los límites aceptables.
A pesar de basarse en los mismos principios, existen diferencias en la implementación. El marco europeo se centra en la reevaluación a lo largo del ciclo de vida del producto y en la coordinación de evaluaciones a nivel de cartera de productos. Por su parte, la guía de la FDA otorga mayor énfasis a la evaluación toxicológica predictiva, especialmente para nitrosaminas sin datos suficientes de carcinogenicidad (NDSRIs), utilizando relaciones estructura-actividad (SAR) para estimar los límites de ingesta aceptable.
A medida que avanza la armonización global a través de iniciativas como el addendum de ICH M7 sobre nitrosaminas, las compañías farmacéuticas requieren cada vez más estrategias analíticas y de cumplimiento capaces de satisfacer tanto las expectativas del ciclo de vida de la EMA como los requisitos de evaluación predictiva de seguridad de la FDA.
Estrategias analíticas para cuantificar nitrosaminas a niveles traza
Los límites cada vez más estrictos definidos en las directrices actuales sobre nitrosaminas exigen métodos analíticos capaces de detectar impurezas a concentraciones extremadamente bajas. Dado que los umbrales de ingesta aceptable suelen encontrarse en el rango de partes por billón (ppb), el análisis farmacéutico depende de técnicas altamente sensibles de cromatografía acoplada a espectrometría de masas para garantizar una cuantificación precisa y el cumplimiento normativo.
Las plataformas más utilizadas combinan separación cromatográfica con espectrometría de masas, en particular UPLC-MS/MS y GC-MS/MS, que ofrecen la selectividad y sensibilidad necesarias para cuantificar múltiples compuestos simultáneamente cumpliendo con los estándares modernos de nitrosaminas. El rendimiento analítico depende, no solo del instrumental, sino también de una preparación de muestra optimizada diseñada para minimizar interferencias de matriz.
Las estrategias de preparación más comunes incluyen:
- Extracción en fase sólida (SPE) para concentrar los analitos y reducir el ruido de fondo.
- Limpieza basada en cromatografía de interacción hidrofílica (HILIC) para mejorar la selectividad en formulaciones complejas.
- Flujos de trabajo específicos de matriz, adaptados tanto a APIs como a productos farmacéuticos terminados.
Un desafío crítico es evitar la formación artefactual de nitrosaminas durante la manipulación de la muestra, que podría generar falsos positivos. La selección cuidadosa de disolventes y el uso de scavengers contribuyen a prevenir reacciones de nitrosación no deseadas, un aspecto cada vez más enfatizado en las directrices actualizadas de nitrosaminas.
Los desarrollos recientes también priorizan flujos de trabajo analíticos más rápidos y robustos, adecuados para el control de calidad rutinario en diversas matrices farmacéuticas. La combinación de tecnologías de detección sensibles y estrategias de preparación optimizadas permite un monitoreo fiable a niveles traza, alineado con las expectativas regulatorias globales y respaldando la seguridad y el cumplimiento continuo del producto.
Evaluación de riesgos y acciones de cumplimiento para compañías farmacéuticas
La evaluación de riesgos es un proceso regulatorio obligatorio y multi-etapa, establecido por las directrices globales sobre nitrosaminas, que permite a los fabricantes farmacéuticos identificar, evaluar y mitigar posibles impurezas nitrosamínicas carcinogénicas en los productos farmacéuticos.
Las acciones de mitigación de riesgos van más allá del simple análisis y requieren mejoras coordinadas en los procesos de fabricación y en los sistemas de calidad. Las estrategias de cumplimiento más habituales incluyen:
- Reformulación o modificación del proceso para eliminar condiciones que favorezcan la nitrosación.
- Refuerzo del control sobre proveedores y materias primas, asegurando trazabilidad y calidad.
- Optimización de los sistemas de calidad y programas de monitorización a lo largo del ciclo de vida del producto.
- Monitorización en tiempo real y prevención de la exposición a agentes nitrosantes durante la fabricación.
El establecimiento de umbrales de ingesta aceptable (IA) mediante agrupamiento estructural permite a las compañías priorizar recursos analíticos y acciones regulatorias, especialmente en el caso de nitrosaminas complejas para las que no existen datos toxicológicos directos. En la práctica, la implementación de estas medidas requiere experiencia integrada en desarrollo analítico, interpretación regulatoria e investigación de impurezas.
Laboratorios colaboradores como AMSbiopharma apoyan a las compañías farmacéuticas combinando capacidades de detección de alta calidad con desarrollo de métodos basados en riesgo y estrategias de análisis alineadas con la normativa, ayudando a traducir los requisitos regulatorios en soluciones de cumplimiento prácticas y sostenibles.
Nuestro laboratorio está equipado con instrumental avanzado, como UPLC-MS/MS, diseñado para alcanzar los límites de detección ultrabajos requeridos por el Apéndice 1 de la directriz actualizada de la EMA sobre nitrosaminas. Te ayudamos a transformar el análisis a niveles traza en un proceso eficiente para presentaciones regulatorias, garantizando la seguridad y disponibilidad continua de tu pipeline terapéutico.
Referencias
European Medicines Agency. Nitrosamine impurities in human medicines [Internet]. Amsterdam: EMA; [cited 2026 Feb 12]. Disponible en: https://www.ema.europa.eu/en/human-regulatory-overview/post-authorisation/referral-procedures-human-medicines/nitrosamine-impurities
European Medicines Agency. ICH M7 assessment and control of DNA reactive (mutagenic) impurities in pharmaceuticals to limit potential carcinogenic risk – Scientific guideline [Internet]. Amsterdam: EMA; 2023 [cited 2026 Feb 12]. Disponible en: https://www.ema.europa.eu/en/ich-m7-assessment-control-dna-reactive-mutagenic-impurities-pharmaceuticals-limit-potential-carcinogenic-risk-scientific-guideline
U.S. Food and Drug Administration. CDER nitrosamine impurity acceptable intake limits [Internet]. Silver Spring, MD: FDA; [cited 2026 Feb 12]. Disponible en: https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/cder-nitrosamine-impurity-acceptable-intake-limits